单组分TMB显色液,单组分TMB过氧化物酶底物液,,化夏试剂

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单组分TMB显色液
英文名：3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine Liquid Substrate
别名：单组分TMB过氧化物酶底物液

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化学性质

3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一种过氧化物酶底物，用于ELISA 反应。底物产生一种可溶性淡蓝色的末端产物，可在370 或 655 nm在分光光度计上读取。TMB反应可以用2 M H2SO4 (产生黄色)终止，450 nm读取。TMB又分可溶型和沉淀型。可溶型：与HRP反应形成可溶性蓝褐色产物，适用于ELISA及其他通过液体反应检测HRP的应用，与HRP反应形成沉淀性蓝褐色产物，一步即用型溶液，无需混合，方便快捷。沉淀型：适用于Western Blot及其免疫沉淀化学等，一步即用型溶液，无需混合，方便快捷单组分TMB过氧化物酶底物正常情况下淡黄色、淡蓝色或者是淡绿色。底物溶液在650nm时检测OD值小于0.04。

质量标准

使用方法
使用之前，以超纯水反复洗涤的适当容器，倒出适量单组分TMB底物溶液，待溶液达到室温即可使用。
加液：加完HRP结合物并温育一定时间后，洗板3－5次，每孔加TMB底物100－150uL， 37°C温育15－30分钟。
终止（备选）：加等体积的1N的HCl或者2N的H2SO4来终止反应。酶标孔中反应液从蓝色变为黄色。
读数：终止反应后，30分钟内在450nm处读数。不加终止液，显色更加稳定，可以在620－650nm处读数。